Untersuchungen kombinierter DNA-Protein-Transduktion zur Optimierung nicht-viralen Gentransfers
Zur Etablierung eines rekombinanten phiC31-TAT-Systems für den nicht-viralen Gentransfer wurden verschiedene phiC31-Integrase-Konstrukte in E. coli BL21 Bakterien rekombinant exprimiert, chromatographisch aufgereinigt und sowohl im Reagenzglas als auch in renalen, alveolären und T-Zelllinien auf Fun...
Verfasser: | |
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Weitere Beteiligte: | |
FB/Einrichtung: | FB 13: Biologie |
Dokumenttypen: | Dissertation/Habilitation |
Medientypen: | Text |
Erscheinungsdatum: | 2011 |
Publikation in MIAMI: | 06.04.2011 |
Datum der letzten Änderung: | 20.05.2016 |
Angaben zur Ausgabe: | [Electronic ed.] |
Schlagwörter: | phiC31; Integrase; Gentransfer; nichtviral; Rekombinase; Expression |
Fachgebiet (DDC): | 570: Biowissenschaften; Biologie |
Lizenz: | InC 1.0 |
Sprache: | Deutsch |
Format: | PDF-Dokument |
URN: | urn:nbn:de:hbz:6-54469533561 |
Permalink: | https://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:hbz:6-54469533561 |
Onlinezugriff: | diss_bohla.pdf |
Zur Etablierung eines rekombinanten phiC31-TAT-Systems für den nicht-viralen Gentransfer wurden verschiedene phiC31-Integrase-Konstrukte in E. coli BL21 Bakterien rekombinant exprimiert, chromatographisch aufgereinigt und sowohl im Reagenzglas als auch in renalen, alveolären und T-Zelllinien auf Funktionalität getestet. Zur Transduktion dieser Integrase-Plasmid-Komplexe in unterschiedliche Zelltypen wurden verschiedene Transduktionsmethoden verwendet. Stellvertretend für Lunge, Niere und Lymphozyten wurden A549-, 293- und Jurkat-T-Zellen mit Komplexen aus rekombinanter Integrase und einem Luziferase-attB-Plasmid behandelt und über einen Zeitraum von einem Monat auf Luziferaseexpression getestet. Der kombinierte phiC31-Integraseprotein-Plasmid-Transfer ist eine vielversprechende Anwendung für den nicht-viralen Gentransfer, was insbesondere durch die Vermittlung stabiler Langzeittransgenexpression in verschiedenen Zelltypen gezeigt werden konnte.