%0 Book %A Hoßbach, Janina %E Moerschbacher, Bruno %D 2015 %G English %T Heterologous production and characterization of chitin deacetylases with chitin binding domains %U https://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:hbz:6-57289607713 %U https://repositorium.uni-muenster.de/document/miami/a88e2754-58a1-4f5c-8d38-09e24169ec0f/diss_hossbach.pdf %7 [Electronic ed.] %X Chitin Deacetylasen (CDAs) katalysieren die Acetamido-Hydrolyse von N-Acetylglucosamin zu Glucosamin in Chitin und Chitosan. Es ist nachgewiesen, dass chemisch produzierte Chitosane ein zufälliges Acetylierungsmuster (PA) aufweisen, welches wahrscheinlich die biologische Aktivität und damit die Anwendung des Polymers beeinflusst. Thema dieser Arbeit ist die Charakterisierung zweier pilzlicher CDAs (BC95 aus Botrytis cinerea und PaCDA aus Podospora anserina), welche zusätzlich zur katalytischen Domäne Chitin-Bindedomänen (CBDs) aufweisen. Die heterologe Produktion beider Enzyme wurde erfolgreich in der Hefe Hansenula polymorpha durchgeführt, jedoch zeigte nur PaCDA Enzymaktivität. Des Weiteren wurden Deletionsvarianten der PaCDA erstellt, um die Rolle der CBDs zu untersuchen. Die Wirkungsweise von PaCDA wurde anhand der Produkte analysiert und ist nicht prozessiv; dennoch produziert das Enzym ein spezifisches Acetylierungsmuster, welches durch alternierende Einheiten gekennzeichnet ist