Syndecan-1 und niedrigenergetische Bestrahlung und deren Einfluss auf Zellmotilität und -viabilität beim Mammakarzinom
Im Rahmen dieser Promotionsarbeit wurde untersucht welchen Einfluss eine Depletion des Heparansulfat-Proteoglykans Syndecan-1 und Bestrahlung im Bereich niedriger Energiedosen auf die Zellmotilität und -viabilität in Mammakarzinomzellen haben. Syndecan-1-defiziente MDA-MB-231 exprimierten vermehrt...
| Verfasser: | |
|---|---|
| Weitere Beteiligte: | |
| Dokumenttypen: | Dissertation/Habilitation |
| Medientypen: | Text |
| Erscheinungsdatum: | 2016 |
| Publikation in MIAMI: | 19.05.2016 |
| Datum der letzten Änderung: | 19.05.2016 |
| Angaben zur Ausgabe: | [Electronic ed.] |
| Schlagwörter: | Syndecan-1; Mammakarzinom; Bestrahlung; Tenascin-C; Zellmotilität; Zellviabilität; Rac1 |
| Fachgebiet (DDC): | 610: Medizin und Gesundheit |
| Lizenz: | InC 1.0 |
| Sprache: | Deutsch |
| Format: | PDF-Dokument |
| URN: | urn:nbn:de:hbz:6-25299484036 |
| Permalink: | https://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:hbz:6-25299484036 |
| Onlinezugriff: | diss_oberschelp.pdf |
Inhaltsverzeichnis:
- Zusammenfassung
- 1 Einleitung 5
- 1.1 Aufbau und Funktion der weiblichen Brust (Schünke et al., 2011) 6
- 1.2 Brustkrebs 7
- 1.2.1 Prävalenz und Ätiologie 7
- 1.2.2 Diagnose und Therapie 9
- 1.3 Syndecan-1 11
- 1.4 Fragestellung 11
- 2 Material und Methoden 12
- 2.1 Brustkrebszelllinien 13
- 2.1.1 MDA-MB-231 13
- 2.1.2 MDA-MB-468 13
- 2.1.3 MCF-7 14
- 2.2 Kultivierung der Brustkrebszellen 14
- 2.3 siRNA-Transfektion 15
- 2.4 Kontrolle der Transfektion/Durchflusszytometrie/BrdU 16
- 2.5 Bestrahlung 18
- 2.6 Genexpressionsanalyse - Quantitative Real-Time-PCR 19
- 2.6.1 RNA-Präparation 19
- 2.6.2 Konzentrationsbestimmung: 20
- 2.6.3 Umschreiben der RNA in cDNA 20
- 2.6.4 Durchführung und Ablauf der Real-Time-PCR 21
- 2.6.5 Real-Time-PCR-Protokoll 1 22
- 2.6.6 Real-Time-PCR-Protokoll 2 23
- 2.7 Genexpressionsanalyse: SDS-PAGE und Western Blot 25
- 2.7.1 Proteinlysate 25
- 2.7.2 BCA-Test 26
- 2.7.3 SDS-PAGE 27
- 2.7.4 Blotting 29
- 2.8 Proliferationsassay (MTT-Test) 31
- 2.9 Motilitätsanalyse mit digitalholographischer Mikroskopie (DHM) 33
- 2.10 Statistik und Analytik 34
- 3 Ergebnisse 38
- 3.1 Durchflusszytometrische Kontrolle des siRNA-Knochdowns 38
- 3.2 Genexpressionsanalysen zur Überprüfung der Regulation von Zielgenen 40
- 3.2.1 Darstellung der veränderten Genregulation nach Transfektion mit Sdc-1- siRNA und nach Bestrahlung mit 2 Gray 41
- 3.3 Expressionsanalyse von FAK und P-FAK auf Proteinebene 44
- 3.4 Einfluss der siRNA-Transfektion auf die Proliferation von MDA-MB-468- und MCF-7-Brustkrebszellen 45
- 3.5 Digitalholographische Mikroskopie 47
- 4 Diskussion 50
- 4.1 Regulation bestimmter Zielgene durch Syndecan-1 und Bestrahlung 51
- 4.2 Proliferative Eigenschaften 54
- 4.3 Motilitätseigenschaften 55
- 4.4 Kritische Beurteilung des Studienaufbaus 55
- 4.5 Fazit 57
- 5 Literaturverzeichnis 60
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